Test rapide d'adénovirus - Sécrétion nasale

Utilisation prévue :

Le kit de test d'acide nucléique SARS-CoV-2 s'applique à la détection qualitative de l'acide nucléique de COVID-19 dans les écouvillons nasopharyngés, les écouvillons oropharyngés et les expectorations. Les résultats des tests fournissent une base de diagnostic moléculaire pour les patients infectés ou suspects, et ne doivent pas être utilisés comme seul critère de diagnostic clinique.

Matériaux:

Procédure de test:

A. Préparation des échantillons

L'ARN extrait est le matériau de départ du kit de test d'acide nucléique SARS-CoV-2.

Important : Chaque procédure d'extraction d'acide nucléique doit être effectuée simultanément avec un contrôle positif (40 μL, diluer avec des solutions salines stériles/PBS au volume souhaité) et un contrôle négatif (40 μL, diluer avec des solutions salines stériles/PBS au volume souhaité).

Il est recommandé d'utiliser les kits d'extraction d'acides nucléiques commerciaux suivants : PureLinkTM Viral RNA/DNA Mini Kit (Invitrogen) ; mini-kit d'ARN viral (QIAGEN); Kit TIANamp Hi-ADN/ARN (TIANGEN);

B. Configuration du mélange réactionnel

1. Tous les réactifs et échantillons doivent être complètement décongelés, mélangés complètement et centrifugés brièvement à température ambiante (plage approximative de 18 à 25 degrés) avant utilisation.

2. Préparez le volume requis de mélange réactionnel dans un tube de microcentrifugeuse en polypropylène de taille appropriée.

3. Pipetez 25 µL du mélange réactionnel dans chaque puits requis d'une plaque de réaction 96-puits optique appropriée ou d'un tube de réaction optique approprié.

C. Ajout de modèle

1. Ajouter 5 μL d'ARN extrait des Échantillons/Contrôle positif/Contrôle négatif. Le volume total est de 30 µL.

2. Mélanger soigneusement les échantillons et les contrôles avec le mélange réactionnel en pipetant de haut en bas/Vortex.

3. Fermez la plaque de réaction 96-puits avec des couvercles appropriés ou un film adhésif optique et les tubes de réaction avec des couvercles appropriés.

4. Centrifugez la plaque de réaction 96-puits dans une centrifugeuse avec un rotor de plaque de microtitration pendant 30 secondes à environ 2 500 tr/min.

D. Programmation de l'instrument de PCR en temps réel

Pour des informations de base concernant la configuration et la programmation des différents instruments de PCR en temps réel, veuillez vous référer au manuel d'utilisation de l'instrument respectif. Le test a été optimisé pour le système de PCR en temps réel ABI7500. L'analyse de PCR est effectuée dans des conditions de cycle telles que décrites dans le tableau ci-dessous.

Définir les détecteurs de fluorescence

*Veuillez régler la référence interne de fluorescence de l'instrument sur "Aucune", par exemple : Pour les instruments de la série ABI, réglez "Référence passive" sur "Aucune".

E. Analyse des données

Veuillez définir les paramètres d'analyse et analyser les données conformément aux instructions d'utilisation des instruments concernés.

Prenez ABI 7500 comme exemple :

La ligne de base doit être définie sur une plage qui élimine la fluorescence de fond trouvée dans les premiers cycles d'amplification, mais qui ne chevauche pas la zone où les signaux d'amplification s'élèvent au-dessus du fond (valeur de début : 3 à 10 ; valeur de fin : {{2} }). Le seuil de cycle (Ct) doit être dans la base de la phase exponentielle. Cliquez sur "Analyse" pour obtenir automatiquement le résultat de l'analyse et lisez le résultat de la détection dans la fenêtre "Rapport".

étiquette à chaud: adénovirus rapide tester - nasale sécrétion, Chine, fournisseurs, fabricants, usine, en gros